在藥物分析、環(huán)境監(jiān)測、食品安全等領(lǐng)域，高效液相色譜（HPLC）及其衍生技術(shù)（如UPLC）是核心的分析工具。為了確保這些方法能可靠、準確地用于其預(yù)定目的，必須進行嚴格的方法學(xué)驗證。其主要驗證項目包括：

1.專屬性/特異性：證明方法能準確區(qū)分目標分析物與可能共存的雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、基質(zhì)成分等干擾物質(zhì)的能力。這是方法可靠性的基石。

2.準確度：指測定結(jié)果與真實值（或公認參考值）的接近程度。通常通過在已知濃度的樣品（如加標空白基質(zhì)）中進行回收率試驗來評估。

3.精密度：

*重復(fù)性：在短時間內(nèi)，由同一操作者使用同一儀器，對同一樣品進行多次測定的接近程度（日內(nèi)精密度）。

*中間精密度：考察方法在不同實驗日、不同操作者、不同儀器（同一實驗室）等變化因素下的精密度。

*重現(xiàn)性：（通常指實驗室間）在不同實驗室間執(zhí)行同一方法的精密度。

4.線性：在設(shè)定的濃度范圍內(nèi)，檢測響應(yīng)值（如峰面積）與分析物濃度成比例關(guān)系的能力。通過一系列濃度標準溶液建立校準曲線并評估其線性。

5.范圍：指能達到可接受的準確度、精密度和線性的濃度區(qū)間。通常涵蓋從定量限（LOQ）到上限濃度的范圍，應(yīng)覆蓋實際樣品預(yù)期的濃度。

6.檢測限（LOD）：分析物能被可靠地檢測到（信噪比S/N≥3），但尚不能準確定量的最低濃度。

7.定量限（LOQ）：分析物在可接受的準確度和精密度水平下能夠被定量測定的最低濃度（信噪比S/N≥10）。

8.耐用性/穩(wěn)健性：評估方法參數(shù)（如流動相比例、pH值、流速、柱溫、不同品牌色譜柱等）發(fā)生微小、有意變化時，測定結(jié)果不受影響的能力。這預(yù)示了方法在日常使用中的穩(wěn)定性。

廣州中森檢測與系統(tǒng)適用性測試（SST）

在方法學(xué)驗證完成并建立后，每次正式運行液相檢測前，都必須進行系統(tǒng)適用性測試（SST）。廣州中森檢測等專業(yè)機構(gòu)在開展檢測服務(wù)時，會嚴格遵循此步驟。

SST的目的是確保整個分析系統(tǒng)（儀器、色譜柱、流動相、操作）在分析當天能滿足方法驗證時確立的性能標準，是方法能否成功應(yīng)用于具體檢測的“通行證”。

典型的SST參數(shù)包括：

*理論塔板數(shù)（N）：衡量色譜柱效能的指標。

*拖尾因子（T）：評估色譜峰對稱性，過大表示可能存在吸附或柱效問題。

*分離度（R）：衡量相鄰色譜峰分離程度的關(guān)鍵指標，尤其對于多組分分析。

*重復(fù)性：通常通過連續(xù)進樣標準品或?qū)φ掌啡芤海ㄈ?-6針）計算主峰保留時間和峰面積的相對標準偏差（RSD%），評估系統(tǒng)的精密度。

*容量因子（k'）：反映分析物在固定相上的保留強度。

*壓力波動：監(jiān)測系統(tǒng)壓力穩(wěn)定性。

廣州中森檢測會在每次檢測前，按照具體方法的規(guī)定，配制特定的系統(tǒng)適用性溶液（通常是標準品或?qū)φ掌啡芤海\行并計算上述關(guān)鍵參數(shù)。只有當所有SST結(jié)果均符合方法預(yù)設(shè)的接受標準時，才會開始正式樣品的分析，從而最大限度地保證檢測數(shù)據(jù)的準確性和可靠性。

總結(jié)：方法學(xué)驗證是建立可靠液相分析方法的基礎(chǔ)，涵蓋專屬性、準確度、精密度等關(guān)鍵性能指標。而系統(tǒng)適用性測試（SST）則是驗證后方法在每次具體應(yīng)用時的“守門員”，確保分析系統(tǒng)在檢測當天處于可控且符合要求的狀態(tài)，兩者缺一不可，共同保障了液相檢測結(jié)果的質(zhì)量。